Jimi Mistry est né à Scarborough dans le Yorkshire, d'un père indien et d'une mère irlandaise. Il va d'abord à l'école St James' Catholic High à Cheadle Hulme, Stockport de 1985 à 1988 avant que sa famille démenage à Cardiff où il rejoint l'école Radyr Comprehensive School. Il étudie ensuite à la réputée Birmingham School of Acting'.

Il est d'abord reconnu grâce à son rôle de médecin gay, Fred Fonseca, dans la série anglaise EastEnders. Il interpréte aussi un homosexuel dans Touch of Pink, une comédie romantique qui met en scène un musulman canadien, Ismaili, et ses relations désastreuses avec sa mère et son amant.

Dans son premier film, Fish and chips, Jimi Mistry est un métis anglo-pakistanais. Il décroche ensuite un rôle dans un film américain à gros budget en 2002, Le Gourou et les femmes, dans lequel il interprète Ramu Gupta, un danseur indien qui déménage à New York pour devenir une star. Il joue ensuite dans The Truth About Love, etre autres.

Mistry est marié depuis 2001. Sa femme Meg et lui ont un enfant.