Jason Edward Mewes perce l'écran en 1994 dans une comédie de Kevin Smith, Clerks, les employés modèles, où il joue le rôle de Jay, fidèle ami de Silent Bob, personnage à la verve impressionnante, gros fumeur d'herbe et pervers notoire, rôle qu'il reprend dans Les Glandeurs, Méprise multiple, Dogma, Jay et Bob contre-attaquent.

Par la suite, il fera des apparitions dans quasiment tous les films de son ami Kevin Smith. Une boutade lancée par Jay dans Jay & Bob contre-attaquent (« Un film sur nous? qui paierait pour aller voir ça ? ») est à l'origine du projet Jay & Bob contre-attaquent en 2001. Jay et Silent Bob doivent ici empêcher le tournage d'un film tiré de la BD qui met en scène leur propre vie. On peut également les apercevoir brièvement dans Scream 3 de Wes Craven.

Jason Mewes a eu de nombreux problèmes dus à une dépendance à la cocaïne et à l'héroïne.
Depuis il a fait des films comme High Hopes, Feast, Bottom's up avec Paris Hilton, Clerks 2 où il reprend à nouveau son rôle de Jay. Entre temps, il a aussi joué dans la serie Degrassi : La Nouvelle Génération (saison 5 - épisodes 11 et 12 produit par Kevin Smith).

Ses derniers films sont, entre autres, The Tripper de David Arquette et Zack et Miri font un porno de Kevin Smith.